1.尋找該物種的耐寒或非耐寒的天然突變體(如果該物種容易被人工突變，也可采用人工誘變)，提取兩種動物的細胞mRNA，看耐寒或非耐寒個體與正常個體的基因表達譜差異。
現在普遍采用壹種偷懶的方法。提取動物細胞的基因組並切割成幾個片段，然後連接報道基因以制備表達質粒並轉移到動物細胞中。然後用低溫誘導的方法。如果壹個報告基因在細胞中表達，證明與該報告基因相連的壹段dna序列可以在低溫下被誘導表達，該基因可能是抗凍基因的啟動子。