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lamp的使用詳情

目前國內基因診斷常采用PCR方法,涉及到PCR儀,該儀器價格國產和進口價格不壹,便宜的2~3萬也能買到,貴的20多萬。條件比較好的實驗室和國家機構也有嘗試熒光定量PCR方法的,該方法技術含量高,必須使用熒光定量PCR儀,價格在20~70萬不等。

使用環介導等溫擴增技術的產品在臨床診斷中是不需要特殊儀器的,但臨床使用的成品試劑盒在研發過程中由於涉及引物的選擇,引物濃度的調整,及反應溫度和時間的優化,需要用壹種量化的方式去幫助研究者分析選擇數據,因此我們推薦使用榮研公司的專利產品LA-320C或LA-500實時濁度儀。

環介導等溫擴增法,英文名稱為loop-mediatedisothermal amplification,,是壹種新型的核酸擴增方法,其特點是針對靶基因的6個區域設計4種特異引物,在鏈置換DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)的作用下,60--65℃恒溫擴增,15-60分鐘左右即可實現10^9~10^10倍的核酸擴增,具有操作簡單、特異性強、產物易檢測等特點。在DNA合成時,從脫氧核糖核酸三磷酸底物(dNTPs)中析出的焦磷酸離子與反應溶液中的鎂離子反應,產生大量焦磷酸鎂沈澱,呈現白色。因此,可以把渾濁度作為反應的指標,只用肉眼觀察白色渾濁沈澱,就能鑒定擴增與否,而不需要繁瑣的電泳和紫外觀察。由於環介導等溫擴增反應不需要PCR儀和昂貴的試劑,有著廣泛的應用前景。

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