早晨起床後某壹個時刻，比如早上六點鐘排尿壹次，但是這次尿壹定要丟掉也就是說不能流入容器中。從這壹個時刻以後的24小時，排出的所有尿液都要留在容器中。直到次日的同壹個時刻，也就是第二天早上六點，最後排壹次尿，但是壹定要流入容器中。
然後把容器的尿液混勻，用尿杯量出尿的總量，並且記錄下來，再從中取壹小部分尿樣找入壹個潔凈幹燥的小瓶送檢，要提醒的是要按照醫院要求決定是否放入防腐劑。
另外女性患者在月經期間或者白帶過多的時候，最好不要留24小時尿。以免引起誤差。另外或者再留取的時候壹定要註意會陰部的清潔以免汙染。