我提取了其中壹個。
尿沈渣的檢查也叫尿沈渣的檢查,是將新鮮尿液離心,然後用顯微鏡檢查尿沈渣的壹種檢查方法[1]。由於儀器分析的發展,現代尿液可見成分可以通過非離心、激光熒光染色、流動分析,(Sysmex UF50,UF100)或計算機圖像自動識別系統(Iris IQ200)進行檢測,因此也可以稱為尿液中的顆粒分析[2]。目前,我國大多數醫院實驗室仍習慣於傳統的普通顯微鏡檢查方法。由於尿液中有許多可見成分,如細胞、管狀物、微生物、晶體等,為了進壹步識別和鑒定這些成分,有相差顯微鏡、偏光顯微鏡、熒光顯微鏡、幹涉顯微鏡、電子顯微鏡等,可分為染色法和非染色法。非染色檢驗是最簡單和最常用的檢驗方法。尿液有形成分檢查的重要性在於,它是尿液分析中不可缺少的檢查方法,對臨床診斷、治療監測和健康調查具有重要的臨床意義。可以確定進入尿路的細胞類型,如紅細胞增多癥,提示尿路出血,進壹步檢查紅細胞形態有助於確定出血來源於腎小球還是下尿路。白(膿)細胞增多提示尿路感染;不同尿路上皮細胞的增殖有助於判斷各種尿路病變的部位;管型增多常提示腎小球腎炎、腎小管(遠端和集合管病變)和腎功能不全;發現代謝的結晶或藥物來源也有很大的臨床價值[3]。
壹、尿液有形成分檢驗方法
有很多方法可以檢查尿液的形成。以下是對8種比較選擇方法要點的簡要說明:
1.傳統離心法:1997國家臨床檢驗操作規程[4](第二版)明確規定了非染色尿沈渣和染色尿沈渣鏡檢的操作規程,但在操作中未規定離心機的類型,僅規定1500r/min離心5分鐘,未規定尿滯留時間、檢驗時間、結果判定和報告方法。顯微鏡觀察10×10保管型、10×40、10視野顯示細胞的最低值和最高值,觀察管型用高倍顯微鏡鑒定,但計數數用低倍顯微鏡觀察20個視野,計算壹個視野的平均記錄結果。提交人檢查了三級、二級和初級醫院的尿檢記錄。有些醫院將尿杯或試管中的尿沈渣直接倒在載玻片上(無蓋),不采用定量的玻璃板計數進行報告,而報告仍采用傳統的加號(-、+、++、++、++++),管型和上皮細胞不分類,報告壹點點、+、++。病房尿往往可以在檢查前幾個小時留置(規定明確規定早上空腹6550)。應在1h內送檢)這種傳統方法隨意多變,受操作者主觀性影響,判斷不規範,結果不壹致,沒有可比性。因為報告方法因人而異,是壹種缺乏規範的實驗方法,應該淘汰。
2.標準鏡檢法:針對上述情況,中華醫學會檢驗學分會臨床檢驗組於2002年召開了三次尿鏡檢標準化會議,提出了尿沈渣檢驗標準化的建議[5]。建議明確規定尿沈渣檢查的材料和儀器、標本、收集和運輸、操作步驟及尿沈渣報告內容。比如容器、離心管、尿沈渣計數板、離心機(臥式)的相對離心力要在400×g左右,而顯微鏡要求內置光強可調的光源,要有40倍、10倍的物鏡和10倍的目鏡。標本的收集、運輸和接收有明確的規定。此方法適合在各級醫療單位推廣,加快讀-10或Kova板即可完成。由於操作統壹,結果準確,報告壹致,是壹種值得推薦的尿沈渣檢查方法。問題是如何建立質量保證體系,進行室內質量控制,密切聯系臨床和心室間質評,定期進行沈渣專業培訓,使尿沈渣鑒定熟練,不遺漏病理有形成分的要求[5]。
3.尿液有形成分染色法:尿液有形成分染色的作用是:(1)防止血栓滲漏;(2)防止誤診;(3)防止長時間顯微鏡檢查引起的疲勞;(4)為尿液中典型病理成分的長期保存創造條件,為教學和科研提供圖譜。尿液有形成分的染色體方法可分為:①單壹染色法;②復合染色;③活體染色;④差異染色;⑤特殊染色等[6]。日本伊藤推薦了壹種標準的尿液采集方法和四種染色方法。NCCLS公布的尿液檢查方案Gp16A[7]中提到“染色法對細胞和管型的鑒別很有幫助”,提倡馬爾賓染色(結晶紫和沙黃法)和0.5%甲苯胺藍。同時列舉了鑒別尿液萬分之壹的特殊染色方法:①脂肪和橢圓形脂肪體:油紅或蘇丹紅ⅲ;②細菌:革蘭氏染色和巴氏染色[7]。歐洲尿液分析組引用Sternheimer染色法,阿爾辛-藍-派羅寧B)[2] b [2]優於Sternheimer-Malbin染色法。我們的尿液實驗室也證實了S染色可以彌補S-M染色的缺點,是六種染色方法中最好的壹種[8]。
4.尿液中的顆粒過濾法:可將壹定量的尿液(20~100ml)通過特制的過濾網過濾並將管型、細胞等病理顆粒保留在過濾網上[10],部分紅細胞可通過過濾網置於電鏡下觀察[11]。我們在德國波恩大學醫院泌尿外科實驗室也看到過帶專用註射器和過濾器的商業產品。可惜因為濾網必須染色鑒定,染色後有些細胞溶解,而且這種方法價格昂貴,所以很難普及[12]。
5.細胞計數池上不離心計數尿液的快速篩分法:直接將不離心的尿液放入尿液細胞計數池中是國家臨床檢驗操作規程中介紹的壹種定量過濾方法,歐洲不推薦。因為結果不敏感,不規範,所以結果不穩定[2]。但筆者曾經在上海市第六人民醫院紐鮑爾改進的血細胞計數池中觀察到5個細胞×2,很快就能得到實驗結果。泌尿科醫生認為有利於觀察病情,判斷療效和病情的走向。但在國外,強調用濃度為0.2mm(總面積為0.0625mm2)的富克斯-羅森塔爾板進行全液體檢查,視野開闊,結果更準確可靠[2]。
6.尿沈渣工作站:工作站集成了攝像顯微鏡、尿沈渣計數板和計算機,如Plyson AMP-2000U、華信DiasysR/S、合肥新月SQ-3000、美德泰增洋、重慶天海US2020、北京國聯在線QO-S染色尿沈渣分析儀、錢勝QS8005過程尿沈渣分析儀。包括標準移動計數室,各種鍵盤控制\標準條碼識別,自動清洗,自動采樣,報告時可復制壹張視野圖)。無論是哪個廠家生產的尿沈渣工作站,都要強調標準化,即留尿樣量、離心力、離心時間、沈澱物滯留、顯微鏡鏡頭(最好帶相差鏡頭)、報告方法等都要符合標準顯微鏡的要求。這種方法的優點是計算機報告。清潔移動電腦板,需要去除蛋白質汙垢,完全自動計數識別,避免主觀因素。
7.熒光染料流式細胞儀:Sysmex公司生產的UF50和UF-100尿沈渣流式細胞儀,利用沈渣中可見成分DNA與細胞膜和菲啶、羰基氰兩種熒光染料接觸,然後通過鞘流進行激光照射,各須成分產生前向散射光強和熒光脈沖寬度,再通過電阻抗測量紅細胞和血細胞大小散點圖和直方圖。該儀器可自動報告紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型、細菌五個定量參數,小圓上皮細胞、黴菌、病理管型、晶體、精子五個定性參數,還可測量尿液電導率。由於不需要離心,檢測速度快,病理成分的靈敏度和重復性好,由於每個尿樣的檢測步驟模式壹致,便於質量控制(用標準檢測顆粒)和標準化。如果與幹化學試紙結合,還可以通過計算機處理觀察兩者的符合程度,在血尿的臨床診斷、尿路感染的判定、腎功能的了解等方面得到了重視。儀器的缺點是價格高,不能檢測滴蟲、脂肪滴、病理和藥物結晶,也不能識別病毒包涵體或腫瘤細胞;當尿液中有大量細菌、酵母、晶體等顆粒時,可幹擾紅細胞計數結果;圖像中無法識別陰影紅細胞和各種病理管型[13]。
8.體外診斷尿液成像系統——全自動智能顯微鏡(AIM): 1983黃色虹膜顯微鏡工作站是IRIS公司引進的,尿液中的各種顆粒在AIM上成像,經計算機處理後顯示在熒光屏上。2000年,公司引進了改良的大型939UDX全自動尿液分析儀,並於2002年通過了美國美國食品藥品監督管理局(FDA)認證的小型IQ-200系統。包括專利的免載玻片顯微鏡和獨特的高速代碼軟件,我們可以輕松查看尿液中的各種常見淚液,即白細胞、白細胞、紅細胞、鱗狀上皮細胞、非鱗狀上皮細胞、透明管型、未分類管型、晶體、細菌、酵母、精子和粘液。鑒定結果可以根據操作者的需要進行修改,以區分尿液中可見成分的亞型。IQ-200在原理上是先進的。它集成了尿液中各種顆粒的大小、對比度、形狀、紋理等技術參數,由高靈敏度的計算機判斷顆粒的性質。據初步報道,IQ-200的總體靈敏度為83%(其中紅細胞89.4%,白細胞93.9%,細菌93.9%)。總體特異性為83.3%(其中紅細胞89.2%,白細胞88.8%,細菌88.1)。用IQ-200顯微鏡復檢率可以低於5% (UF往往在20%以上),但是否需要用這種方法進壹步鑒別各種細胞管型,如用漢遜染色嗜酸性粒細胞,用蘇丹紅ⅲ染色脂肪管型等,壹直沒有解決。該儀器小巧便攜,屏幕上顯示多種病理顆粒和相關質控顆粒。但在該儀器中沒有發現壓力鞘流系統,缺乏直觀的染色數據。廠家在展會上建議將456個尿樣與UF-100進行比對。IQ-200發現14病理管狀UF-100檢出65438+。
二、尿液有形成分的鑒定
尿液中的成分超過45種,比較常見。
1.紅細胞:尿液中典型的紅細胞呈雙凹圓盤狀,淡黃色,直徑約8um,易於識別。然而,由於尿液顆粒的復雜性和多樣性,尿液紅細胞可能會因高溫、長時間、pH值變化和滲透壓變化而發生形狀變化。無經驗的檢驗人員應將其與酵母樣真菌、真菌孢子、脂肪滴、澱粉顆粒、草酸鈣晶體、尿酸鹽晶體和精子頭區分開來。通過測試。
2.白細胞:尿液中的細胞以中性粒細胞為主,偶見單核細胞、淋巴細胞和嗜酸性粒細胞。新鮮尿液中白細胞外觀完整,圓形直徑65,438+00um ~ 65,438+04um,胞漿內顆粒可見,細胞核清晰,常呈散在狀。在低滲和堿性尿中,白細胞常膨脹,約有壹半可在2h內溶解,而在高滲和酸性尿中。老尿中的白細胞血漿因勻漿而呈膠狀。發炎時,變性的白細胞大多外觀不規則,結構模糊。細胞質內可充滿粗顆粒,核結構不清。細胞常粘在壹起,細胞界限不清,稱為膿細胞。白細胞可分為:(1)重染細胞:染色深的老化或死亡白細胞;(2)淺染細胞:淺染的細胞為活性白細胞,尿比重> 1015時可見;(3)閃光細胞:在低滲尿中,中性粒細胞變大,分子在細胞質中移動。光線折射時可以看到閃光現象。3.管型:是尿液有形成分中的重要成分,其數量和類型構成對腎實質病變的診斷、治療觀察和後判斷有壹定價值。三種常見的細胞管型是紅細胞管型、腎小管上皮細胞管型和腎小管上皮細胞管型。