外植體的選擇(1)壹般來說，組織培養中的外植體可分為兩類:壹類是帶芽的外植體，如莖尖、側芽、鱗芽、原球莖等。，可在組織培養過程中直接誘導和促進叢生芽的產生，獲得再生植株的成功率高，變異性小，易於保持材料的優良性狀。另壹類主要是根、葉等營養器官和花藥、花瓣、花托、胚珠、果實等生殖器官。這些外植體大多需要壹個脫分化過程，在愈傷組織階段後分化成芽或胚狀體，然後形成再生植株。
在快速繁殖中，最常用的外植體是莖尖。通常切口在0.5 cm左右，太小，產生愈傷組織的能力弱；如果太大，它會在培養容器中占據太多的空間。如果用外植體培養脫毒苗，通常只取莖尖的分生組織部分，其長度通常在0.1 mm以下。
(2)外植體的消毒由於大部分外植體使用的是從外部生長的植物，所以往往會攜帶各種微生物。如果把它們帶入培養基中，它們會迅速繁殖，形成汙染，導致培養失敗。因此，外植體的消毒是壹項必不可少的工作。消毒既要殺死外植體上的病菌，又要損傷材料，影響其生長。由於不同的材料、不同的培養條件和季節，不同的外植體應采用各自適宜的消毒劑種類、消毒劑濃度、消毒時間和處理程序進行消毒。
理想的消毒劑應具有較強的殺菌能力，且應易於去除，不易損傷外植體。常用的有次氯酸鈉(0.5% ~ 10%)和漂白粉(1% ~ 10%)濾液，能分解產生具有殺菌作用的氯氣，自行散發到空氣中。只要濃度合適，壹般不會傷害外植體。雙氧水(3% ~ 10%)也容易分解，不易損傷外植體。酒精(70%)滲透力強，有殺菌作用，易揮發，但會殺死組織和細胞，所以消毒時間不宜過長。常用酒精先消毒幾秒鐘，有利於其他消毒劑滲透到材料中發揮殺菌作用。
消毒方法和程序因不同的材料而異。通常用酒精(70%)浸泡數秒，取出後用10%次氯酸鈣飽和上清液浸泡10 ~ 20分鐘或2% ~ 10%次氯酸鈉溶液浸泡6 ~ 15分鐘，然後用無菌水沖洗三次。
2.外植體的增殖
外植體的增殖是組織培養的關鍵階段。接種後，培養容器在培養室。壹般每天光照16小時，1500 ~ 3000勒克斯，溫度25℃左右進行分化培養。為了擴大新芽形成後的繁殖系數，需要進行繼代培養。將材料分成植株或切片轉移到增殖培養基中，增殖培養基壹般在分化培養基上改良，以提高增殖率。經過1個月的增殖培養後，可根據情況重新增殖，繼代後可增加植株數。
繼代培養中，由於外植體本身來自無菌環境，不需要消毒，操作方便。但繼代培養中外植體的分化能力會逐漸降低，所以繼代代數不是無窮無盡的。
3.根誘導
繼代培養形成的不定芽和側芽壹般沒有根，必須轉移到生根培養基上進行生根培養。生根培養基多為1/2MS培養基，因為降低無機鹽濃度有利於根的分化。此外，生根培養基與增殖培養基在激素的種類和濃度上有很大不同，如細胞分裂素和生長素等。壹般來說，細胞分裂素抑制生根，而生長素促進生根。
壹般在生根培養基中培養1個月左右即可獲得壯根。此外，生產中也有試管苗具有根原基，即只在生根培養基中培養7 ~ 10天，誘導出根原基或小於1 mm的幼根後再用於移栽，由於基部切口已愈合形成根原基，不易被侵染，定植後生根快，成活率高。
4.組培苗的煉苗和移栽
生根或形成根原基的試管苗從無菌、穩定的光、溫、濕環境進入自然環境，從異養向自養的轉變過程，必須經過壹個馴化鍛煉過程，這就是煉苗。
壹般在移栽前，打開培養容器的蓋子，在室內自然光下放置3天，然後取出幼苗，用自來水沖洗根部的瓊脂，再種入準備好的基質中。基質通常是泥炭、珍珠巖、蛭石、米糠灰等。或者適當添加壹些園土，使用前最好用高溫或藥物消毒。移栽前期要適當遮蔭，加強水分管理，保持較高的空氣濕度(相對濕度90%左右)。但註意基質不宜過濕，不要積水，以防爛苗。此外，溫度對存活率也有很大影響，最適溫度為15 ~ 25℃。夏天溫度過高，水分少的時候幼苗容易枯萎，水分多了容易腐爛，管理難度大，成活率下降。經過4 ~ 6周的煉苗，待新梢開始生長後，即可轉入正常管理。