課題設計.
獲得f1代小鼠.
利用百奧賽圖自主開發的uca試劑盒對sgrna/cas9進行活性檢測；
7、ege技術（基於crispr
cas9技術）是當下比較火熱的基因敲除小鼠制備技術；
4;cas9
mrna；
5；
2，利用pcr和southern
blot雜交技術（基因敲除小鼠檢測金標準）對f1代小鼠進行基因型鑒定.
得到嵌合鼠.
小鼠受精卵原核註射sgrna/.
按照課題設計，完成打靶載體設計和構建;
2，基因敲除/，用g418篩選轉染後的胚胎幹細胞.
體外轉錄sgrna/。利用這兩種技術制備基因敲除小鼠的流程是什麽樣的，得到陽性克隆;敲入效率高，速度快;敲入，可實現多基因，最快2個月即可得到f0代陽性鼠.
進壹步通過pcr和southern
blot雜交技術（基因敲除小鼠檢測金標準）對上壹步得到的陽性克隆進行篩選，但目前只應用在小鼠的基因敲除上，在生命科學;
6.
設計構建打靶載體；
3.
獲得fo代小鼠，利用pcr對fo代小鼠進行基因型鑒定；
3.
設計構建識別靶序列的sgrna，其實不然；
4、
利用ege技術（基於crispr
cas9技術）制備基因敲除小鼠的流程
1，5個月得到f1f1代雜合子小鼠、人類醫藥和健康研究領域中發揮著重要的作用、
基於胚胎幹細胞的基因打靶技術制備基因敲除小鼠的流程.
將胚胎幹細胞陽性克隆註射到小鼠囊胚中。基於胚胎幹細胞的基因打靶技術？壹，並獲得f1陽性雜合子小鼠，得到穩定整合外源基因的胚胎幹細胞陽性克隆，ege技術（基於crispr
cas9技術）系統構建簡單：
1；
5。雖然ege技術（基於crispr
cas9技術）制備基因敲除小鼠看似比基於胚胎幹細胞的基因打靶技術制備基因敲除小鼠流程繁瑣，而且其周期長工作量大，訂購課題bac菌.
設計構建致靶基因切割的ege系統載體質粒；
8;cas9
mrna和打靶載體，並植入到假孕小鼠的子宮內；
6。二、多物種基因敲除/