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當高保真酶pcr基因片段時,不同的cr產生不同的長度。原因是什麽?

常見的高保真酶有Pfu和Pfu Ultra,但我用過最好的高保真酶是Phusion。

因為壹般高保真酶具有核酸外切酶活性,雖然保真度提高了,但擴增效率會降低,所以使用Pfu時,擴增時間往往比Taq酶長,Pfu Ultra更好。但Taq酶P有條帶是必然的。如果換成高保真酶,直接P可能沒有結果,或者條帶很弱。

Phusion最好,保真度可能是Taq酶的50倍左右,而且太強,基本沒有p。

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