柞蠶核型多角體病毒(ApNPV)載體表達系統的構建
柞蠶NPV載體表達系統基因工程的研究始於1985年。經過多年的努力,克隆了柞蠶NPV多角體蛋白基因,並進行了DNA序列分析,確定了該基因的轉錄起始位點,構建轉移表達載體。同時還建立對柞蠶NPV敏感的樗蠶蛹精巢細胞株系。1992年,在昆蟲細胞和柞蠶蛹體內表達外源基因獲得成功,初步建成了柞蠶NPV載體表達系統。同年申請國家發明專利,並於1997年獲得國家專利局的專利授權(專利號92103655.8)。 該所科研人員分析並鑒定了柞蠶蛹抗菌活性物質的主要成分,其中包括抗菌肽A、B、D、溶菌酶和凝激素等主要成份;對這些蛋白進行了分離純化及其性質分析;闡明了抗菌活性物質與柞蠶品種間的關系,為柞蠶抗病育種提供了理論依據。
利用雌蠶蛾開發研制成九如天寶口服液,用於治療老年性前列腺肥大和婦女更年期綜合癥。上述兩個產品已成功轉讓給海南欣安生物工程制藥有限公司,取得了可喜的經濟效益。
經過培養篩選,獲得了可連續傳代培養的樗蠶精巢細胞系,目前已穩定傳至上百代。細胞對ApNPV感染實驗表明,60%左右的傳代細胞可被ApNPV感染。進壹步用ApNPV-DNA轉染樗蠶精巢傳代細胞也獲得成功。樗蠶精巢細胞系的建立為國內外首次報道。 昆蟲抗菌肽具有較強的抗菌、抗病毒、提高機體免疫功能等作用。在體外常用於殺菌劑,並用於植物轉基因抗細菌病育種。為滿足這壹需求,依據昆蟲抗菌肽B基因的序列,采用人工化學合成的方法合成並克隆了昆蟲抗菌肽B基因,為下壹步開展相應得研究打下基礎。