1，人乳頭瘤病毒檢測常見錯誤
誤區1:檢測低風險人乳頭瘤病毒有臨床價值。
臨床上，我們經常看到患者的人乳頭瘤病毒檢測報告中包含低危人乳頭瘤病毒。事實上，檢測低風險的人乳頭瘤病毒是壹種誤解，並且錯誤地認為低風險的人乳頭瘤病毒與高風險的人乳頭瘤病毒具有相同的癌癥風險。2015-11-26中國食品藥品監督管理局(CFDA)發布了《人乳頭瘤病毒(人乳頭瘤病毒)檢測和基因分型及試劑技術審評指導原則》，明確了我國人乳頭瘤病毒檢測的類型範圍——僅針對用於宮頸癌相關預期目的的18人乳頭瘤病毒基因型核酸。根據世界衛生組織(世衛組織)、國際癌癥研究機構(IARC)等國際組織的研究結果，建議HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58。基因型26、53、66、73和82 * * *被劃分為中等風險類型，所有這些基因型都只需要針對上述18人乳頭瘤病毒基因型進行與宮頸癌相關的預期用途的檢測；同時指出，低危人乳頭瘤病毒壹般與尖銳濕疣或低度鱗狀上皮內病變有關，檢測的臨床價值尚不明確。因此，檢測低危人乳頭瘤病毒不能起到宮頸癌篩查的作用是壹種誤解。
誤區二:人乳頭瘤病毒檢測的目的是為了發現有無病毒。
80%的女性可能壹生都會感染人乳頭瘤病毒，大部分都太可愛了，無法被自身免疫系統清除，所以不會產生病變，也就是說感染不等於病變。所以人乳頭瘤病毒檢測是用來發現宮頸病變[如宮頸上皮內瘤變(CIN)2+]的患者，而不是用來發現是否有病毒的！目前，人乳頭瘤病毒檢測技術不能很好地滿足臨床需要。理想的人乳頭瘤病毒檢測方法需要較高的臨床敏感性和特異性。臨床靈敏度不同於分析靈敏度。前者需要長時間的大樣本才能獲得臨床驗證試驗，而分析靈敏度是指檢測方法在實驗室條件下所能檢測到的最低人乳頭瘤病毒拷貝數或滴度。前者旨在臨床上發現患者，後者旨在發現人乳頭瘤病毒病毒是否存在。因此，壹個好的臨床人乳頭瘤病毒檢測方法，既能保證對CIN2+患者有非常高的檢出率，又能最大限度地降低未經臨床驗證無法確定臨床檢測閾值(截止值)而導致的高假陽性率。CFDA在指南《體外診斷試劑人乳頭瘤病毒檢測的性能要求》中明確指出，壹項人乳頭瘤病毒檢測技術如果需要獲得批準，必須有壹定的臨界值，這是臨床試驗陽性和陰性的界限。在2013《世衛組織宮頸癌篩查與管理指南》中，對人乳頭瘤病毒檢測的臨界值設定有具體建議，建議高危人乳頭瘤病毒檢測的臨界值應≥ 1.0 ng/L，然而，即使是FDA認證的高危人乳頭瘤病毒檢測技術的陽性預測值也不夠高(4.3% ~ 20.1%)。在臨床實踐中，使用未經臨床驗證試驗評估的HPVDNA檢測方法，容易導致過度診斷，引發壹系列社會問題，增加醫療費用。
誤區3:人乳頭瘤病毒的定量檢測值越高，病變越嚴重。
目前臨床上使用的所有人乳頭瘤病毒檢測方法都沒有定量的人乳頭瘤病毒檢測方法；從現有的檢測手段來看，難以溯源或重復，是無法實現定量檢測的根本原因。雜交捕獲(HC2)人乳頭瘤病毒檢測技術使用相對光單位/截止臨床閾值(RLU/壹氧化碳，相對光調諧/截止)來檢測高危人乳頭瘤病毒。很多臨床醫生誤認為RLU/壹氧化碳值越高，病變越嚴重，RLU/壹氧化碳值越低，病變越輕。事實上，只要人乳頭瘤病毒呈陽性(RLU/CO≥1.0)，無論RLU/CO值如何，都可以引起CIN和宮頸癌。壹項對349例ASC-US HC2陽性細胞學病例的研究發現，正常細胞學、CIN1和CIN2+的RLU/壹氧化碳中位數分別為42.68、146.45和156.43，三組的置信區間有很大重疊。結論是RLU/CO值與CIN相同。需要註意的是，本研究中的RLU/CO值是受試者的人乳頭瘤病毒病毒載量之和，也就是說，如果感染多個亞型，RLU/CO值代表所有陽性亞型的病毒載量之和。對於只感染壹種人乳頭瘤病毒亞型(如HPV16)的女性，測得值越高，CIN2+的風險越高(HR: 1.34，95% CI 1.10 ~ 1.64)。總之，人乳頭瘤病毒的檢測值與病變的嚴重程度之間沒有絕對的對應關系。
誤區四:不同人乳頭瘤病毒檢測技術的檢測結果應該是壹樣的。
實際上，臨床上有很多人乳頭瘤病毒檢測產品，不同產品的檢測結果會因為靶基因片段、方法、人乳頭瘤病毒亞型的不同而有所差異。目前，* * *有四種人乳頭瘤病毒檢測技術通過了FDA的宮頸癌篩查認證，分別是HC2、Cervista、Cobas和Aptima，分別是2003年、2009年、2011年4月和2011年6月。HC2通過核酸雜交的信號擴增方法檢測到13高危型人乳頭瘤病毒(HPV16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68)的基因組。即E1、E2、E4、E5、E6、E7、L1、L2、LCR * * 9基因片段，由於HC2檢測不需要初級擴增，受交叉汙染和樣本采集因素影響很小，有時可能會影響PCR檢測和結果；Cervista使用Invader，壹種檢測特定核苷酸序列的信號擴增方法，檢測14高危人乳頭瘤病毒(13和66亞型)的L1、E6和E7基因片段；Cobas采用聚合酶鏈式反應(PCR)的靶擴增方法檢測上述14高危型HPVL1基因片段，是美國唯壹被FDA批準用於宮頸癌篩查的人乳頭瘤病毒檢測技術。Aptima采用轉錄介導擴增(TMA)的靶擴增方法檢測上述14高危人乳頭瘤病毒的E6和E7mRNA片段。所以即使是FDA認證的人乳頭瘤病毒檢測技術，目標基因片段、方法、亞型不同，結果也可能不同。
研究表明，65% ~ 75%的宮頸癌由HPV16和18亞型引起，其他高危型占25% ~ 35%。因此，人乳頭瘤病毒亞型16和18比其他亞型具有更高的癌癥風險，這也是FDA批準cobas HPV16、18和非18分型檢測方法用於25歲以上女性初篩的重要原因。值得關註的是，與前三種HPVDNA檢測技術不同，Aptima的檢測目標是HPVE6？
2.人乳頭瘤病毒的感染過程
那麽人乳頭瘤病毒是如何感染子宮頸的呢？人乳頭瘤病毒是壹種嗜上皮病毒，直徑約為50-60納米，約有150個亞型，其中35種可感染女性生殖道。根據病毒和腫瘤的危險性，人乳頭瘤病毒可分為低危型和高危型，人乳頭瘤病毒型HPV16和18最危險。人乳頭瘤病毒感染的過程是:首先病毒與基底膜上的硫酸乙酰肝素蛋白受體(HSPG)結合，然後暴露L2的易感部位，被N-前體蛋白轉化酶消化。在感染上皮的邊緣，L1的未暴露區域結合壹個未知的第二受體，通過細胞吞噬作用在2-4小時形成早期內涵體，在3-12小時形成晚期內涵體。病毒。
人乳頭瘤病毒病毒通過粘膜微創表面感染鱗狀上皮基底層。病毒去除外殼後，DNA進入宿主細胞核，然後首先表達E6/E7癌基因，加速感染細胞的分裂。人乳頭瘤病毒DNA隨分裂細胞上移，E1/E2/4/5基因隨感染細胞的分裂依次表達。E1/E2與病毒基因復制有關，E4蛋白與病毒基因的最後階段有關。當感染細胞進入終末分化階段，病毒外殼蛋白L1和L2基因開始表達，新組裝的病毒隨死亡的上皮細胞脫落。隨著人乳頭瘤病毒感染時間的延長，DNA整合的比例增加，發生病變的風險增加。