(1)培養基配方:I: PDA(馬鈴薯200g,葡萄糖18g,瓊脂18g,水1000m1)。ⅱ:PDA+硫酸鎂1.5g+磷酸二氫鉀3g+蛋白腖2g,水1000ml。ⅲ:馬鈴薯100g,幹鋸末100g,葡萄糖20g,瓊脂20g,水1000ml。
將上述配方的培養基高壓滅菌20分鐘,制成試管斜面,3天內用完。
(2)制作方法:將選取的大球蓋菇組織塊接種到NoI .通過組織分離技術的培養基(或接種待復壯的保存物種)。在24-28℃培養10-15天後,當菌絲在試管中長到1: 3-1: 4時,選擇菌絲前端膨大的粗壯部分轉移到2號或3號培養基上,采用兩點接種法使菌絲在培養基(壹般為65438+)表面快速生長 健壯,生命力強,有利於原種菌絲的生長,縮短原種培養時間,提高產量。
2.原種和生產用種的生產
(1)配方:I:小麥或大麥88%,米糠或麥麩10%,石膏或碳酸鈣1%,石灰0.5%,含水量65%(加入米糠或麥麩主要是疏松培養基,增加透氣性,使菌絲活動良好)。2號:小麥25%,稭稈64%,麥麩10%,石膏粉1%,含水量65%-70%。ⅲ:鋸末42%,刨花42%,米糠或麥麩15%,硫酸鎂0.2%,石膏或碳酸鈣1%,含水量70%。
上述配方在1.3-1.5 kg/m2壓力下消毒2-2.5小時,3天內用完。
(2)原料的選擇和準備:實踐證明,平菇原種和生產種制作的培養基主要原料是小麥,其次是木屑和刨花,還有稭稈。
(3)麥粒的選擇:最好選擇外皮暗黃或暗紅的麥粒,質地堅韌,浸泡時不易破碎。就吸水性而言,大麥優於小麥。
(4)浸泡:浸泡可分為石灰水浸泡和清水預煮後加入石灰兩種方法。前者用1%石灰水浸泡,pH值為9 ~ 10,小麥浸泡8 ~ 9小時,大麥浸泡9 ~ 10小時,溫度25℃,夏季水溫高時時間應適當縮短。浸泡過的麥粒,用手指甲捏,彈性很強,指甲印應該很快就會消失。後者先用清水浸泡麥粒,時間與桌上相同。將浸泡後的麥粒用清水洗凈,瀝幹,放入鍋中煮至剛剛沸騰,冷卻後打開,與鋪料混合,用0.5%石灰調至pH6.5,含水量65%。
(5)裝瓶消毒:選擇容積為700ml、瓶口內徑約3cm的淡白色高溫玻璃瓶(不宜用廣口瓶,以免雜菌侵入),將混勻的培養料裝入瓶中,每瓶200-300 g,在1.3 ~ 1.5kg/m2壓力下消毒2-2.5小時。
(4)接種培養:采用多點接種,即在瓶內培養料周圍適當距離接種3-4個點,然後在料面上接種壹小片菌種,在24-28℃下黑暗培養7-10天。當菌絲萌發生長至直徑約4cm的噬菌斑時,立即人工攪拌接種點的菌絲,攪拌點的菌絲即被打碎。
3.生產物種的生產:
(1)配方、培養基制作、選瓶、消毒同原種。
(2)接種:在生產培養基表面接種滿瓶的原種,盡量鋪開料面,避免雜菌汙染。每瓶原種接種不超過30瓶生產用種子。在24-28℃培養7-10天後,當菌絲萌發並長到白色、粗壯時,人工攪拌菌絲使菌絲破裂,刺激其快速生長,壹般為20天。