壹、外來體樣本的選擇及註意事項
不同的實驗樣本在采集時需要註意的點不同。妳在研究什麽樣的樣本，需要特別註意哪些方面？看下面的解釋:
1，細胞上清液
選擇細胞培養上清液作為外來體分離的實驗材料，不會像血液樣本壹樣存在樣本量限制的問題，而且操作簡單，可以直接離心。但在細胞培養過程中應註意汙染、培養時間、細胞死亡率和FBS。和所有的細胞實驗壹樣，培養過程中不允許汙染，但有些培養的細胞本身攜帶病毒基因組，在培養過程中會釋放出病毒顆粒，這就要看病毒顆粒是否會影響後續的實驗。
壹般來說，細胞在培養24-48h後可以分離出外來體。特殊情況下，如果在培養基中加入特殊的化學物質，培養15-60min後即可收集。因為細胞死亡會分泌小體，所以在研究外來體時，細胞死亡率必須控制在5%以內。未處理的FBS中含有大量的外來體，因此必須使用處理過的無外來體的FBS進行細胞培養。
2.唾液
唾液的成分會隨著取樣的位置和時間而變化，所以需要像血樣壹樣固定和定時。唾液主要由舌下腺、頜下腺和腮腺分泌，所以不同位置的唾液成分不同，收集時需要固定位置或收集全部唾液。不同時間段唾液成分會有所不同，需要定期服用。其他的，比如抽煙，吃東西，都是被禁止的。壹般來說，建議采樣1h內不要吃東西，包括飲料，也不要劇烈運動，在平靜的狀態下采樣。最後，不要刷牙。
3.血
在第壹次外分泌課程中，許多學生就血清和血漿的選擇提出了問題。我們應該選擇哪壹個？血漿=血液-血細胞血清=血漿-纖維蛋白原-凝血因子
如果分不清兩者的區別，找出血清的來源就能牢牢記住。血清是血液凝固後收集的液體，所以缺乏纖維蛋白原、凝血因子和大量凝血產物。纖維蛋白原可轉化為纖維蛋白，具有凝血功能。血小板在凝血過程中會分泌大量的外來體，有研究發現血清中有近50%的外來體來自額外分泌。所以壹般實驗都選擇等離子。在特殊情況下，比如血小板相關疾病的研究，當然血清更合適。
受樣本限制，血樣壹般為2ml。抽血需要註意什麽？在研究外來體的血液樣本時，壹個經常被忽視的問題是針頭的大小。抽血過程中，血液流經針頭時，會產生剪切力。如果針太細，剪切力大，會使細胞破裂或刺激血小板分泌外泌體，影響後續實驗。有文獻報道21號針頭更適合用於外分泌研究的血樣采集。其他如采血地點、人體生理周期、飲食周期、時間周期(24h)等都會影響樣本中的外泌體。所以采樣的時候，盡量做到固定，定時。最後，需要註意的是，樣本應在采血後30分鐘內進行處理，因為血液在采集管中采集時，血細胞和血小板也會分泌外泌體。
4、流鼻涕
研究鼻涕有壹個特殊的價值，可以探索治療性的外來體。什麽是治療性外來體？在腦部疾病的治療中，可以將藥物作為外泌體註入鼻腔，使藥物避開血腦屏障。鼻涕的收集與很多環境因素有關，如年齡、季節、性別、城市、過敏史、職業風險等。鼻涕的采集沒有統壹的標準，只要保證所有樣本采樣方式壹致即可。
5.尿
在尿液取樣中，除了性別、年齡、飲食的影響外，還有壹個特別的點就是尿液的新鮮度，是指尿液在膀胱內存在的時間。
6.牛奶
乳汁中的外來體和抗體會影響新生兒的發育，有很大的研究價值。泌乳的階段、胎次、飲食、產奶量、哺乳、母親的健康狀況、精神狀態都會影響外泌體的分泌。需要註意的是，牛奶中含有大量的脂蛋白，會影響後期外泌體的分離。
7.腦脊髓液
腦脊液研究的難點主要在樣本的獲取，樣本中缺乏外泌體，使其雪上加霜。那這個問題怎麽解決呢？國外可以購買商業正常樣本，也可以使用其他疾病樣本作為對照。
第二，外來體的保存
對於外泌體的保存，和其他分子樣品壹樣，提取的外泌體可以低溫保存，可以短時間(壹周內)放在4度，長時間放在-20或-80。有人認為放在4度比較好，怕低溫凍融影響外泌體的完整性，但目前還沒有定論，多數文獻認為沒有影響。那應該放多少度呢？有壹招，分包-20或者-80，是否合適。